嘔吐毒素 檢測(cè)原理
檢測(cè)基于抗原抗體反應(yīng)。檢測(cè)板上預(yù)包被嘔吐毒素(deoxynivalenol,DON)偶聯(lián)抗原,加入校準(zhǔn)品/樣本、酶標(biāo)試劑以及抗體工作液后,校準(zhǔn)品/樣本中的嘔吐毒素 同檢測(cè)板上預(yù)包被的抗原競(jìng)爭(zhēng)抗體上的抗原結(jié)合位點(diǎn)。檢測(cè)板上抗原結(jié)合的抗體量與校準(zhǔn)品/樣本中 嘔吐毒素 濃度呈負(fù)相關(guān)。經(jīng) TMB 底物顯色,樣本吸光值與其嘔吐毒素的含量呈負(fù)相關(guān),與標(biāo)準(zhǔn)曲線比較即可得出樣本中嘔吐毒素的含量。
嘔吐毒素檢測(cè)樣本類型
飼料原料及成品飼料。特殊樣本基質(zhì)可能對(duì)檢測(cè)造成影響,如需開(kāi)發(fā)他前處理方法請(qǐng)致電我們。
嘔吐毒素檢測(cè)試劑盒技術(shù)參數(shù)
檢測(cè)范圍:250ppb~5000ppb
反應(yīng)溫度:25℃
反應(yīng)時(shí)間:20min
嘔吐毒素試劑盒組成
嘔吐毒素稀釋液:50ml*2 瓶
嘔吐毒素檢測(cè)板:96T
嘔吐毒素校準(zhǔn)品:1.5mL*5 支
嘔吐毒素抗體工作液:8mL
嘔吐毒素酶標(biāo)試劑:8mL
顯色液:15mL
終止液:15mL
蓋板膜 2 張、
質(zhì)檢報(bào)告 1 份、
說(shuō)明書(shū) 1 份
校準(zhǔn)品 1~5 濃度分別為:0ppb、250ppb、1000ppb、2000ppb、5000ppb。
(1ppb=1ng/mL=1ng/g=1μ g/kg)(注:樣本在前處理過(guò)程中稀釋了 50 倍,校準(zhǔn)品實(shí)際濃度為設(shè)定濃度的 1/50,計(jì)算原始樣本濃度時(shí)無(wú)需換算。)
嘔吐毒素檢測(cè)所需材料(不提供)
酶標(biāo)儀(450、630nm 濾光片)、天平(感量 0.01g)、粉碎機(jī)、振蕩器、離心機(jī)、洗板機(jī)/洗瓶、單、多道移液器及槍頭(單道 10~100μL、20~200μL、多道 30~300μL)、量筒、有蓋的玻璃容器、離心管、加樣槽、吸水紙、計(jì)時(shí)器、甲醇(分析純)、蒸餾水
嘔吐毒素檢測(cè)簡(jiǎn)易操作步驟
1. 提取:樣本按 1:5(w:v)的比例加 70%甲醇,震蕩提取 3min,4000rpm離心 5min。
2. 稀釋:取上清液 100μL 加 900μL 嘔吐毒素稀釋液,混勻待檢。
3. 加樣:向檢測(cè)板中依次加入嘔吐毒素校準(zhǔn)品/待測(cè)樣本 50μL、嘔吐毒素酶標(biāo)試劑50μL、嘔吐毒素抗體工作液 50μL,25℃孵育 15min。
4. 洗板:蒸餾水洗板 4 次,拍干。
5. 顯色:加顯色液 100μL/孔,25℃避光孵育 5min。
6. 終止:加終止液 100μL 孔,酶標(biāo)儀讀數(shù)。
7. 計(jì)算:數(shù)據(jù)帶入計(jì)算軟件。
貯藏方法及有效期
2~8℃干燥保存,有效期 12 個(gè)月